《生活飲用水標準檢驗方法》：產氣莢膜梭狀芽孢杆菌整體解決方案

2023年3月17日經國家市場監督管理總局（國家標準化管理委員會(hui) ）批準發布GB/T 5750-2023《生活飲用水標準檢驗方法》係列標準，代替實施16年之久的GB/T 5750-2006 《生活飲用水標準檢驗方法》。

新標準將於(yu) 2023年10月1日起正式實施。 GB/T 5750-2023標準曆時5年，經過了3輪意見征求，有280+單位參與(yu) 研製與(yu) 驗證，有超過500名行業(ye) 專(zhuan) 家參與(yu) 的GB/T 5750修訂工作，最終大功告成。

本次修訂微生物指標主要內(nei) 容：新增腸球菌和產(chan) 氣莢膜梭狀芽孢杆菌兩(liang) 個(ge) 檢測指標、3種檢測方法和增加菌落總數酶底物法新方法。

其中產(chan) 氣莢膜梭狀芽孢杆菌是新增檢測指標，有些老師不清楚檢測過程中需要用到哪些設備，我們(men) 根據標準的要求做個(ge) 簡單介紹。

根據標準要求我們(men) 需要準備以下儀(yi) 器和耗材：

1.  電子天平：實驗室常用儀(yi) 器

2.  pH計或精密pH試紙：實驗室常用儀(yi) 器或耗材

3.  恒溫培養(yang) 箱：實驗室常用儀(yi) 器

4.  冰箱：實驗室常用儀(yi) 器

5.  恒溫水浴箱：實驗室常用儀(yi) 器

6.  顯微鏡：實驗室常用儀(yi) 器

7.  無菌吸管：實驗室常用耗材或儀(yi) 器

8.  無菌試管：實驗室常用耗材

9.  無菌平皿：實驗室常用耗材

10. 厭氧培養(yang) 裝置：華端生物HD-AN係列智能厭氧微需氧培養(yang) 係統

11. 過濾設備：華端生物HD-F係列水中微生物膜過濾裝置

12. 濾膜:實驗室常用耗材

13. 無齒鑷子：實驗室常用耗材

其他會(hui) 用到的設備：HD-C係列菌落計數儀(yi) 、HD-DT係列自動樣品稀釋儀(yi) 、HD-GM係列全自動革蘭(lan) 氏染色儀(yi) 、HD-S係列自動培養(yang) 基分裝儀(yi) 、HD-MA係列自動微生物生化鑒定係統

產(chan) 氣莢膜梭狀芽孢杆菌檢測流程圖

一、 樣品

1. 汙染較輕的水樣，可直接取100 ml水樣進行檢驗。

2. 汙染嚴(yan) 重的水樣，可使用0.1%緩衝(chong) 蛋白腖水將水樣按10倍係列稀釋，取100ml進行檢驗。

使用華端生物HD-DT係列自動樣品稀釋儀(yi) ：自動稱重，自動按比例稀釋。

二、 過濾水樣

先用無菌鑷子夾取無菌濾膜邊緣部分，將濾膜正麵朝上貼放在已滅菌的濾床上，固定好濾器，將100 ml水樣注入濾器中，打開濾器閥門，在-5.07X104Pa(-0.5 個(ge) 大氣壓)下抽濾。每次試驗均需要用100 mL0.1%緩衝(chong) 蛋白腖水講行空白對照。

使用華端生物HD-F係列水中微生物膜過濾裝置：配備直排泵，無需廢液瓶，直排廢液；火焰滅菌支架和濾杯，提高實驗效率。

三、厭氧培養(yang)

過濾完水樣後，關(guan) 上濾器閥門，取下濾器，用無菌鑷子夾取濾膜邊緣部分，移濾膜倒置在SPS瓊脂培養(yang) 基上，濾膜截留細菌麵與(yu) 培養(yang) 基貼緊，避免氣泡產(chan) 生，然後將平皿倒置於(yu) 厭氧培養(yang) 裝置內(nei) ，於(yu) 36℃±1℃厭氧培養(yang) 18 h~ h，計數黑色菌落數。

使用華端生物HD-AN係列智能厭氧微需氧培養(yang) 係統：使用靈活、成本低，培養(yang) 效果有保障，操作簡單、智能。

四、 菌落計數

對濾膜上證實為(wei) 產(chan) 氣莢膜梭狀芽孢杆菌的菌落進行計數

使用華端生物HD-C係列菌落計數儀(yi) ：手動菌落計數器輔助計數，操作方便；全自動菌落計數儀(yi) ：軟件自動計數，計數快捷、準確。

五、 細菌鑒定

用上述培養(yang) 液塗片，革蘭(lan) 氏染色、鏡檢。產(chan) 氣莢膜梭狀芽孢杆菌為(wei) 革蘭(lan) 陽性粗大杆菌，其耐熱菌株可能形成卵形芽抱,位於(yu) 菌體(ti) 中央或近端，其寬度一般不超過菌體(ti) 寬度。

使用華端生物HD-GM係列全自動革蘭(lan) 氏染色儀(yi) ：自動化的染色儀(yi) 使革蘭(lan) 氏染色實驗自動化、標準化，批量大時可節約大量時間。

使用華端生物HD-MA係列自動微生物生化鑒定係統：標準化的試劑操作，儀(yi) 器自動判讀結果，避免人工判讀偏差。

六、 其他儀(yi) 器

使用華端生物HD-S係列自動培養(yang) 基分裝儀(yi) ：自動分裝培養(yang) 基或者其他微生物試劑，方便、快速。

使用華端生物HD-M係列微生物質譜快速鑒定儀(yi) ：相比傳(chuan) 統鑒定方式更快出結果、準確性更高、操作更簡單、檢測範圍更廣。

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